ELISA -故障排除

信号弱或无信号

不正确的试剂存储

仔细检查您是否遵循了套件制造商的建议。

抗体在4°C保存数周或反复冻融循环

使用新鲜抗体。

过期的试剂

不要使用过期的试剂。

不正确的稀释准备

检查一下您的计算是否正确。使用浓度较高的检测试剂。

不正确的分析设置

重复化验，确保试剂已按照规程制备并按正确顺序添加。

印版阅读器设置不正确

确保您的微孔板阅读器设置反映了推荐的波长/滤光片。

使用的抗体不足

增加您的第一抗体和/或第二抗体的浓度

水井被移液器或洗涤液头损坏。

手动移液时，点液和吸液时要小心。如果需要，重新校准您的自动洗盘机，使尖端不接触井的底部。

高背景信号

不正确的孵化温度

按照试剂盒制造商的建议或优化孵化温度

不正确的孵化时间

按照试剂盒制造商的建议或优化孵育时间

清洗不足

如果手动移液，将吸液板倒置在吸收性组织上，并让其完全排出，以清除任何残留液体。增加洗涤循环次数也可能是有用的。

暴露于光下的衬底

在黑暗中进行基质培养

反应没有停止

确保使用协议中建议的停止解决方案，以避免过度开发。

不一致的复制

清洗不足

如果手动移液，将吸液板倒置在吸收性组织上，并让其完全排出，以清除任何残留液体。增加洗涤循环次数也可能是有用的。

捕获抗体无板结合

按照协议中的建议，准备好涂层和阻塞步骤。确保您使用的是ELISA板。

不正确的板密封

不要重复使用密封剂，以避免井间污染。在孵育期间使用板封。