FRET和双分子荧光互补剂(BiFC)均可使用配有合适滤光片的任何荧光微孔板读数仪进行测量。 由于FRET的光谱范围非常宽,因此建议在仪器的光谱范围内测试波长大于600 nm的荧光染料,因为在某些读数仪中,光谱范围可选择扩展到850或900 nm 。 与BRET一样,使用滤光片时的FRET性能通常要优于光栅。
现代微孔板读数仪能够测量TR-FRET是很常见的,它是一个可选功能,在低端或较旧的仪器中可能会没有这个功能。 但是,在设置中几乎不使用术语TR-FRET替代TRF(时间分辨荧光)。 从仪器的角度来看,TR-FRET测量只是两个TRF测量的组合。 一个是供体,一个受体。 使用滤光片而不是光栅进行TR-FRET测量也具有更好的性能,仪器的光谱范围必须能够测量所有涉及的荧光染料,因为在某些TR-FRET分析中通常在665 nm处进行测量。
荧光寿命测量需要非常特殊的硬件,在任何多功能读数仪中均无法使用。 过去,包括Tecan和伯托公司在内的主要制造商提供了几种不同的仪器,但其中大多数已停产,并且目前唯一具有荧光寿命功能的微孔板读数仪是荧光创新公司的NovaFluor PR。
伯托公司为PPI研究推荐的微孔板读数仪
方法 | Apollo 11 LB 913 | Centro LB 963 | Tristar 3 | Tristar 5 |
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酵母双杂交系统 | ||||
分裂泛素系统 | ||||
FRET (SE FRET) | ||||
TR-FRET | ||||
BiFC | ||||
荧光寿命成像显微镜-荧光共振能量转移(FLIM-FRET) | ||||
分裂荧光素酶互补分析 | ||||
BRET |