虽然名称可能相似,但是必须将发光读数仪与光度仪和光子测光仪区分开来:

  • 光度计是一个非常宽泛的术语,包括任何可测量光的设备,包括发光读数仪,测光表,分光光度计等。
  • 测光仪也是一个广义术语,但通常是指摄影中用于测量环境光的小型设备。

伯托公司的发光读数仪

伯托公司是发光检测领域的先驱和市场领导者。 在这里,您可以找到我们提供的主要的发光读数仪类型。 在下面,您将找到有关发光读数仪的原理以及不同类型的发光读数仪的更多信息。

发光读数仪的原理

为了能够测量最小量的发光读数仪,请使用光电倍增管(PMT)。光电倍增管极大地放大了输入信号,从而可检测到微弱的信号。 PMT的工作原理是:

由于光电效应,在PMT入射窗口处撞击光电阴极的光子会产生电子。
这些电子然后被高压场加速,并通过二次发射过程在倍增极链内成倍增加。
放大后的电子最终到达阳极,该阳极连接到输出处理电路。
该电路将输入信号转换为输出信号,该输出信号可以是脉冲(如果PMT在光子计数模式下工作)或模拟电流(如果PMT在模拟模式下又称为电流模式)。光子计数模式可提供最佳灵敏度,并且是发光测量的最佳模式,而模拟模式在高光强度下效果更好,并且在荧光测量中很受欢迎。

为了捕获尽可能多的光子,必须将PMT放置在非常靠近样品的位置,并处于最佳位置,以减少来自样品的光子损失,同时(对于板式发光读数仪而言)应使光子远离来自相邻的孔(孔间干扰)。

除了PMT之外,发光读数仪的其他重要部分还包括:

  1. 暗室:必须绝对保护要测量样品的区域免受外界光线的照射。暗室也必须适合于所测量的样品形式:试管,平板或其他容器。
  2. 进样器:并非总是需要它们,但是由于化学反应可提供发光,因此必须将一些试剂添加到样品中。如果反应动力学较慢,则可以手动添加试剂,而反应动力学较快,则试剂进样器有利于精确控制试剂分配和测量之间的时间,如果反应仅持续一或两秒钟,则可能需要进样器,例如快速测定。
  3. 大多数发光读数仪不需要滤光片或者光栅,所有波长的光都可以汇集在一起并进行测量。但是,某些分析(例如BRET)需要滤光片以分离样品中不同蛋白质发出的发光。 

为了捕获尽可能多的光子,必须将PMT放置在非常靠近样品的位置,并处于最佳位置,以减少来自样品的光子损失,同时(对于板式发光仪而言)应使光子远离来自相邻的孔(孔间干扰)。

除了PMT之外,发光仪的其他重要部分还包括:

  • 暗室:必须绝对保护要测量样品的区域免受外界光线的照射。暗室也必须适合于所测量的样品形式:试管,平板或其他容器。
  • 进样器:并非总是需要它们,但是由于化学反应可提供发光,因此必须将一些试剂添加到样品中。如果反应动力学较慢,则可以手动添加试剂,而反应动力学较快,则试剂进样器有利于精确控制试剂分配和测量之间的时间,如果反应仅持续一或两秒钟,则可能需要进样器,例如快速测定。

大多数发光仪不需要滤光片或者光栅,所有波长的光都可以汇集在一起并进行测量。但是,某些分析(例如BRET)需要滤光片以分离样品中不同蛋白质发出的发光。

发光读数仪的类型

发光读数仪分类的一种有用方法是根据它们测量的样本类型分类,因为这会影响通量,灵活性,可靠性和价格。

管式发光读数仪

管式发光读数仪可以测量试管,微量离心管或类似物中包含的样品。 它们是简单的仪器,操作人员必须手动插入一个接一个地测量样品。 这限制了通量,但由于在PMT的位置上没有任何妥协,因此提供了高灵敏度和可靠性。

某些管式发光读数仪可以配备进样器,在快速测定(具有快速动力学的发光测定)中分配试剂是必需的。

有几种类型的管式光度计:

台式管式发光读数仪

它们是最敏感和最可靠的,但相对笨重。 它们是样品量少的实验室的首选仪器。 Sirius 2 LB 9526Lumat LB 9510是高性能台式管式发光读数仪。

它们足够轻,便于携带,可以用电池供电,在现场使用。它们的灵敏度低于台式光度计,但仍能为苛刻的应用提供足够的性能。Junior LB 9509是一款优秀的便携式测光仪。

手持式测光仪

它们可被视为便携式光度计的一个子类。它们甚至更小、更轻,但它们的性能非常低,通常只用于定性检测(例如判别表面是否被污染)。由于其主要应用是对表面进行卫生监测,它们通常使用特殊的棉签进行测量,用来擦拭表面并直接插入光度计进行测量。

板式发光读数仪

板式发光读数仪可测量微孔板(通常为96孔或384孔微孔板)中包含的样品。 这大大提高了通量,但使仪器更加复杂。 必须实现将测量位置从一个孔移动到另一个孔,并且必须阻挡来自相邻孔的光。 因此,它们比管式发光读数仪更昂贵。

板式发光读数仪的灵敏度通常低于台式管式发光读数仪,Centro XS是市场上最敏感的板式发光读数仪。

多功能读数仪

多功能读数仪不仅可以测量发光但也以使用其他检测技术(例如荧光和光吸收)的微孔板读数仪。 这增加了仪器的复杂性,并且为了平衡所有检测方法的性能而做出了一些必要的折衷,并提供了极大的灵活性,包括使用滤光片或光栅的可能性。 它们通常比微孔板读数仪更昂贵,但Tristar 3多功能微孔板读数仪相对经济,符合任何预算。

活体成像系统

尽管其工作原理与发光读数仪有很大不同,但活体成像系统还是一种用于测量发光的流行仪器。 他们使用相机代替光电倍增管。 这导致较低的灵敏度,但可以在活的动植物中实现光发射的空间定位和数量。

来自伯托公司技术的特色发光读数仪

在这里,您可以看到一些不同类型的最佳发光读数仪示例:管式、板式和多功能。要查询我们的全系列产品,请访问我们的页面管式发光读数仪微孔板读数仪。 如果您需要帮助以选择最适合您的发光读数仪,请与我们联系,我们将竭诚为您服务!