术语“时间分辨荧光（TRF）”可以有两种不同的含义：
- 样品的荧光在被光脉冲激发后作为时间的函数进行监测。 为了消除歧义，此过程通常称为“荧光寿命”测量。
- 使用具有独特荧光寿命的荧光团，以避免荧光寿命截然不同的分子或其他因素（如激发光）引起的干扰。
在讨论微孔板读数仪时，TRF通常是指第二个含义。
选择的荧光团通常是镧系元素的螯合物，由于以下特性，最常见的是Euro，Ter和Sa：
- 其荧光寿命在微秒（μs）的范围内，而在大多数荧光团中，其荧光寿命在纳秒（ns）的范围内。 这样就可以在激发光和样品中任何其他荧光团的荧光都完全衰减之后进行测量。 这大大降低了背景并增加了信噪比。
- 其激发和发射波长之间的较大差异（斯托克斯位移）和狭窄的发射峰有助于进一步提高信噪比。
时间分辨荧光的应用
基于TRF的方法的大信噪比可提供很高的灵敏度。 因此，已经开发出许多利用镧系元素螯合物的时间分辨荧光特性的分析方法。 使用TRF的最受欢迎的检测类型是TR-FRET检测。 不同镧系元素螯合物的独特荧光寿命和光谱特性可用于多重分析方法的开发。
Transcreener® GDP TR-FRET Red Assay with Mithras² Validation of the Mithras² Multimode Microplate Reader with the Transcreener® GDP TR-FRET Red assay
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Transcreener® GDP TR-FRET Red Assay with TriStar² S Validation of the TriStar² S Multimode Microplate Reader with the Transcreener® GDP TR-FRET Red assay
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cAMP/IP-One HTplex HTRF® assay with Mithras cAMP/IP-One HTplex cell-based experiment performed on Mithras LB 940 Multimode Microplate Reader using HTRF® technology
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适合TRF的微孔板读数仪
能够使用滤光片测量高灵敏度荧光并配备闪光灯的微孔板读数仪是TRF的最佳组合（也可以使用基于光栅的仪器，但性能较低）。 对于某些应用，可能需要具有扩展光谱范围（650 nm以上）的检测器。 推荐将以下所有微孔板读数仪于TRF。