什么是假病毒中和实验?
假病毒中和测定（也称为假型病毒中和实验或基于假型的中和测定）是一种实验室方法，用于研究中和病毒进入细胞并预防感染的能力的抗体或药物的作用。
假型或假型粒子是由病毒核心（通常是慢病毒载体）组成的嵌合“病毒”，病毒核心被含有另一种病毒（目标病毒）的表面糖蛋白的脂质包膜所包围。通过使用不会自我复制且不会致病的载体，可以在更安全的环境中研究病毒。对于SARS-CoV-2，假病毒必须表达S糖蛋白，该糖蛋白通过与人血管紧张素转化酶2（ACE2）结合来介导进入宿主细胞。除了目标病毒的表面糖蛋白外，假型病毒还包含萤光素酶基因，该基因仅在进入细胞后才表达。假病毒进入细胞的次数越多，荧光素酶的表达越多，发出的光强度越高。
假病毒中和实验包括在不同浓度的目标抗体存在下孵育细胞和假病毒，并使用板式发光仪或多模式微孔板读数仪测量发射光。如果抗体有效中和表面糖蛋白并阻断假病毒进入细胞，则将测量到光发射的强度显着降低。评价抗体效果的指标是抑制浓度如IC50, IC80或者其他指标。
什么是假病毒中和实验?
中和测定法是非常有价值的工具，用于研究人和动物针对疫苗接种，自然暴露或其他疗法引发的病毒的抗体反应。这些测定通常需要使用野生型病毒，这限制了它们的应用，尤其是当目标是高致病性人类病毒（如SARS-CoV-2）的时候。
假病毒中和实验中使用的复制缺陷型病毒可能是一种安全的替代方法。假病毒具有表面蛋白的构象结构，该构象结构与目标天然病毒的构象结构非常相似。它们还具有使用与目标病毒相同的机制和受体进入细胞的相同能力。它们在进行处理的时候比天然来源的病毒更加安全。
假病毒的独特属性使它们可以在生物安全等级（BSL）2实验室中安全地处理，该实验室通常与对人类健康有中等危害的试剂一起工作。这是一个很大的优势，因为高致病性病毒（例如SARS-CoV-2）需要BSL-3实验室。和大多数研究机构都会拥有BSL-2实验室相比，BSL-3实验室的数量要少得多。
最后，由于该方法基于发光，因此在大动态范围内将非常敏感。
为什么使用伯托公司仪器进行假病毒中和实验是正确的选择?
当您需要进行假病毒中和试验时，伯托公司是您可靠和有能力的合作伙伴。我们很自豪能成为发光测量的先驱之一，在过去的40年里，我们已经设计了20多种不同类型的发光计(从管式到板式)。伯托公司以精确度、灵敏度和可靠性而著称，今天仍是发光仪的市场领导者。
Centro微孔板化学发光仪可用于测定萤光素酶活性，可用于辉光和闪光测定。最多可配备3个高性能进样器。 因为光子计数模式的光电倍增管是经过严格筛选的，所以它具有高灵敏度的特点。 由于减少了交叉感染设计，Centro提供了非常可靠的结果。 以下文章中显示了其性能的一个示例。
A human monoclonal antibody blocking SARS-CoV-2 infection
Naturally mutated spike proteins of SARS-CoV-2 variants show differential levels of cell entry
Tristar 5是一款模块化的高性能微孔板读数仪，在激发和发射两端都配有独立的，用户可选的滤光片和光栅。 它包括先进的对细胞友好的进样器技术和“ One-4-All”全光学系统，可在所有检测模式下保持出色性能。
在下面的文章中，Gaussia荧光素酶而不是萤火虫荧光素酶被用作报告基因测定。 Tristar 5进行Gaussia荧光素酶表达的测量。
其他文献
在下面的文章中，是使用Tristar系统系列的早期版本进行测定的，但效果新的Tristar系统相同。
作者和年份 | 标题 | 仪器 |
|---|---|---|
| Prévost et al. (2020) | Cross-sectional evaluation of humoral responses against SARS-CoV-2 Spike | TriStar LB 941 Multimode Microplate Reader |
| Beaudoin-Bussières et al. (2020) | Decline of humoral responses against SARS-CoV-2 Spike in convalescent individuals | TriStar LB 941 Multimode Microplate Reader |